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更新 2024-10-31 03:35
 
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详细说明

酵母基因组DNA提取试剂盒

背景原理操作方法保存条件纯度检测 专题

中文名称酵母基因组DNA提取试剂盒
中文同义词酵母基因组DNA提取试剂盒
英文名称Yeast Genomic DNA Extraction Kit
英文同义词Yeast Genomic DNA Extraction Kit
CAS号
分子式
分子量0
EINECS号
相关类别DNA提取与纯化;基因;基因组提取
Mol文件Mol File
结构式酵母基因组DNA提取试剂盒 结构式

酵母基因组DNA提取试剂盒 性质

酵母基因组DNA提取试剂盒 用途与合成方法

背景

酵母DNA提取试剂盒(Yeast DNA Kit)采用了一种新型的硅胶柱。在特定条件下,使DNA能在离心过柱的瞬间,结合到纯化柱上,在一定条件下又能将DNA充分洗脱,从而实现DNA的快速纯化。无需酚氯仿抽提,无需酒精沉淀。纯化的DNA可直接用于PCR、Southern杂交和酶切等。

原理

采用改进SDS-碱裂解法裂解细胞并结合破壁酶特异消化酵母细胞壁,能在1小时内从酵母培养液中分离出高纯度质粒DNA。酵母收集后,加入破壁酶去除细胞壁后,然后碱裂法裂解细胞,离心吸附柱内的硅基质膜在高盐、低PH值状态下选择性地结合溶液中的质粒DNA,再通过去蛋白液和漂洗液将杂质和其它细菌成分去除,最后低盐、高PH值的洗脱缓冲液将纯净质粒DNA从硅基质膜上洗脱。

操作方法

酵母细胞经lyticase处理去除细胞壁后,独特的结合液/蛋白酶K迅速裂解细胞和灭活细胞内核酸酶,然后基因组DNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,抑制物去除液和漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质去除,最后低盐的洗脱缓冲液将纯净基因组DNA从硅基质膜上洗脱。

保存条件

室温保存,12个月内有效。Proteinase K与Lyticase-20℃保存。

纯度检测

基因组DNA片段的大小与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素有关。提取的DNA片段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。可配制0.8-1.0%琼脂糖凝胶,使用λ/HindIII判断基因组的大小,完整的基因组大小应在23kb以上。使用分光光度计检测时, OD260/OD280比值应为1.7–1.9之间,如果洗脱时不使用洗脱缓冲液,而使用去离子水洗脱,比值可能偏低,但并不表明DNA纯度不高。

安全信息

MSDS信息

酵母基因组DNA提取试剂盒 上下游产品信息

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