全血MICRORNA提取试剂盒
背景产品特点提取方法用途应用储存条件使用方法
| 中文名称 | 全血MICRORNA提取试剂盒 |
|---|---|
| 中文同义词 | 全血MICRORNA提取试剂盒 |
| 英文名称 | microRNA Extraction Kit From Blood |
| 英文同义词 | microRNA Extraction Kit From Blood |
| CAS号 | |
| 分子式 | |
| 分子量 | 0 |
| EINECS号 | |
| 相关类别 | 非编码RNA相关产品;分子生物学;microRNA功能验证 |
| Mol文件 | Mol File |
| 结构式 |
全血MICRORNA提取试剂盒 性质
全血MICRORNA提取试剂盒 用途与合成方法
背景
RNA酶,强烈有机抽提去除蛋白和DNA,RNA包括微小分子RNA吸附于离心柱内特殊硅基质膜,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质进一步去除,最后低盐的洗脱液将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。
产品特点
离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端 也不需要乙醇沉淀等容易丧失微小分子RNA的步骤。 独有的裂解液配方,可直接裂解全血,不需要先裂解去除红细胞。
提取方法
近年来对RNA干扰和调节性小RNA的广泛研究迫切需要一种能有效提取15-30核苷酸左右大小RNA(包括siRNA和miRNA)的试剂盒。但是传统的RNA提取方法如硅胶膜法不能有效吸附回收,酚/胍抽提和乙醇沉淀并不能有效沉淀回收微小分子RNA,对于血液样本更是难以提取。
全血MICRORNA提取试剂盒采用独特的裂解液能迅速直接裂解全血(液体样本)和灭活细胞RNA酶,强烈去除蛋白和DNA,而RNA包括微小分子RNA吸附于离心柱内特殊硅基质膜,再通过一系列快速的漂洗、离心步骤,将细胞代谢物、蛋白等杂质去除,最后低盐的洗脱液将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。
用途
适用于快速提取各种全血/血浆/液体样本miRNA和其它各种小RNA。
应用
该miRNA提取试剂盒广泛适用于冻存和新鲜的抗凝全血样本(不适用于血清和血浆),每150μl全血可获得~1μg的microRNA。
储存条件
室温可保存2年。
使用方法
1.向1.5ml EP管中加入300μl miRNA Reagent A。将150μl 抗凝全血加入到上述300μl miRNA Reagent A中,立即手腕用力震荡混合均匀。室温静置 5分钟 以充分裂解细胞。 2.向上述裂解完毕的裂解液中加入250μl miRNA Reagent B,上下颠倒混合均匀。13000rpm离心5分钟,吸取550μl上清液,转移到新的1.5ml EP管中。 3.向上述溶液中加入200μl无水乙醇,手腕用力震荡数次,室温放置 5分钟。 4.13000rpm离心10分钟,转移700μl上清液到新的1.5mlEP管中。 5.向上述溶液中加入300μl 异丙醇,手腕用力上下颠倒数次。 6.分两次将上述溶液倒入到 miRNA 吸附柱中,13000rpm离心1分钟,倒掉过滤液。 7.向吸附柱中加入700μl 75%异丙醇洗涤一次,13000rpm离心1分钟,倒掉过滤液。 8.向吸附柱中加入500μl无水乙醇洗涤一次,13000rpm离心1分钟,倒掉过滤液。 9.吸附柱 13000rpm 空离心2分钟,去掉残留的乙醇。 10.将吸附柱放入到新 1.5ml EP管中,室温放置 2分钟,使残留乙醇挥发。在吸附柱滤芯上加入30μl RnaseFree TE Buffer,室温静置 2分钟,13000rpm离心2分钟,洗脱产物即为提取的miRNA。



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