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稳定细胞株构建

应用构建原理操作步骤 专题

中文名称稳定细胞株构建
中文同义词稳定细胞株构建
英文名称Stable cell line construction
英文同义词
CAS号
分子式
分子量0
EINECS号
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Mol文件Mol File
结构式稳定细胞株构建 结构式

稳定细胞株构建 性质

稳定细胞株构建 用途与合成方法

应用

稳定细胞株构建适用于各种研究应用,如重组蛋白和抗体生产、基因编辑、功能性研究等。

构建原理

构建稳定细胞系的基本原理是将外源DNA克隆到具有某种抗性的载体上,载体被转染到宿主细胞并整合到宿主染色体中,用载体中所含的抗性标志进行筛选。最常用的真核表达载体的抗性筛选标志物有新霉素(neomycin)、潮霉素(hygromycin)和嘌呤霉素(puromycin),常用G418来代替新霉素进行选择性筛选,筛选得到可稳定表达目的蛋白,或者稳定表达沉默特定基因的细胞株。

操作步骤

1.载体构建(表达质粒载体、病毒载体);
2.转染/感染;
3.目的蛋白初步检测;
4.抗生素筛选;
5.目的蛋白再次检测(定性/半定量);
6.单克隆细胞株稳定性检测。

安全信息

MSDS信息

稳定细胞株构建 上下游产品信息

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