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操作视频 | 肺炎支原体的灵敏度试验方法 用途:用于支原体的分离培养。 支原体简介 支原体结构简单，缺乏细胞壁，仅有质膜，胞体内有核蛋白体以及一个由环形双链DNA分子组成的原核。大小仅有0.1~0.3μm，最小直径约为100毫微米，可通过滤菌器，会干扰细胞培养等工作的进行。由于能形成丝状与分枝形状，故称为支原体。 不同支原体利用的能源物质不同，如发酵葡萄糖的肺炎支原体、人型支原体等，水解精氨酸的口腔支原体等，还有利用尿素作为能源的解脲支原体。可利用发酵葡萄糖、水解精氨酸、水解尿素等生化反应鉴别支原体。 支原体营养要求一般比细菌高，除必须的基础营养物质外，还需添加10%~20%的动物血清以提供支原体所需的胆固醇。由于大多数的支原体兼性厌氧，有些菌株在活化分离时保持5%~10%二氧化碳环境生长状态更好。解脲支原体在厌氧条件下生长更好。 支原体无细胞壁，对渗透压敏感，对抑制细胞壁合成的抗生素不敏感，因此可添加青霉素抑制细菌的生长。由于渗透压突变会导致支原体破裂死亡，因此培养支原体时，维持适宜的渗透压显得格外重要。此外，在支原体培养中，pH也是重要因素。 肺炎支原体检验依据及培养基原理 支原体检查法在2020年版《中华人民共和国药典》中体现，要求使用支原体肉汤培养基培养监测肺炎支原体。具体操作要求为：将肺炎支原体稀释至10-7~10-9，接种在支原体肉汤培养基中，每个稀释度接种3支试管，置于36℃培养7-14天，观察培养基变色结果。肺炎支原体可以发酵培养基中的葡萄糖，使培养基的pH值降低，遇指示剂酚红使培养基变黄。 猪胃消化粉、牛肉浸粉、酵母浸粉提供碳氮源、维生素和生长因子；葡萄糖为可发酵的糖类；氯化钠维持渗透压；酚红为指示剂。 成分（g/L） 猪胃消化物 10.0牛肉浸粉 5.0酵母浸粉 5.0氯化钠 2.5葡萄糖 5.0酚红 0.02pH值7.6±0.2 25℃ 用法 称取本品 27.52g,加热溶解于 800ml 蒸馏水中,121℃高压灭菌 15 分钟,冷至室温,无菌操作加入 灭活小牛血清或马血清 200ml 和青霉素 80 万单位,混匀,分装无菌试管,备用。 支原体肉汤培养肺炎支原体12天的灵敏度 
支原体肉汤培养基微生物灵敏度试验: 按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置36±1℃需氧培养7-14天。 
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