首先,芳香族前体分支酸酯通过三种蛋白质的作用转化为对氨基苯甲酸(PABA)。 其次,叶酸的蝶啶部分由GTP制成并与PABA偶联生成二氢蝶呤,而由folC,二氢叶酸合成酶或叶酰聚谷氨酸合成酶指定的双功能蛋白会添加初始谷氨酸分子以形成二氢叶酸(H2PteGlu1或二氢蝶呤单谷氨酸)。