反相硅胶色谱柱

吸附的主要原因

反相硅胶柱填充介质（固定相）与样品间常常会发生下列吸附现象：

（1）   残存硅醇基与碱性物质间的离子吸附；

（2）   硅胶表面的金属杂质与金属配位物质间的吸附；

（3）   疏水性强的物质在柱中的蓄积。

以上现象，会引起反相色谱柱柱效下降、拖尾、重复性不良等状况的发生。

清洗方法

1、疏水性物质的去除

使用溶剂（乙腈、甲醇、乙腈与THF的混合溶剂）进行清洗。

考虑样品成分对于溶剂的溶解性，选用比淋洗液浓度高的溶剂、或选用性较低的溶剂进行过柱清洗。这种情况下，有要注意淋洗液中盐的析出现象。

2、碱性物质（金属配位物质）的去除

使用酸性水溶液与溶剂的混合液（0.1%磷酸、0.1%TFA/乙腈、

甲醇的混合液）进行过柱清洗。

*一般来说，清洗时间可选择为过柱5-10个柱体积便可。

在附吸成分其吸附力强时，即使进行过清洗，柱性能也有可能得

不到恢复。另外，请充分考虑淋洗液的pH值，以避免损坏色谱柱。