植物提取物中的蒽醌类及其苷大多数是黄色或橙红色的，羟基蒽醌能溶于碱溶液中而显红或紫红色；蒽酚和二葸醌与碱液不显红色，只能呈黄色，需经氧化成羟基蒽醌后才与碱作用显红色；羟基蒽醌类因结构不同与乙酸镁的甲醇溶液反应可显橙、红、蓝、紫等色，根据此性质可进行比色测定。
1．标准曲线的绘制
取经五氧化二磷干燥24h的大黄素（或大黄酸、1，8-=羟基蒽醌）对照品适量，用碱液（Imol/L氢氧化钠溶液或其与2%氢氧化铵溶液的混合溶液）或0.5%一1%乙酸镁甲醇溶液定容，在500～550nm波长处扫描，在最大吸收波长处测定吸光度，以吸光度对浓度绘制标准曲线，线性范围4～24ug/ml。
2．游离蒽醌的测定
取药物细粉或其制剂粉末适量(约相当于游离蒽醌1. 5mg)加乙醚（或氯仿）溶解，或用索氏提取器回流提取至提取液无色。将乙醚挥干，残渣用甲醇溶解，加乙酸镁甲醇溶液至定容；或将乙醚提取液移入分液漏斗中，用碱液提取并定容，比色测定，依标准曲线计算含量。
3．总蒽醌的测定
(1)先水解后提取 取供试品适量(约相当于总蒽醌1.5mg)，用酸液（1—7. 5mol/L硫酸溶液或1.5～6mol/L盐酸溶液）20～30ml，水浴回流1～2h，以使结合态的蒽醌苷水解，使葸醌游离，再用乙醚（或氯仿）萃取，并将过滤的药物残渣及滤纸经50℃干燥后用乙醚回流提取，待索氏提取器内提取液无色，合并乙醚液，照游离蒽醌测定法测定。
对含还原型蒽酮苷（如番泻苷）的样品，根据其可被氯化铁氧化，酸水解成氧化型蒽醌苷元这一原理，称取供试品适量，加水30ml超声处理1 5-30min（提高溶解、提取效率，大大缩短溶解、提取时间），加10. 5%氯化铁溶液20ml，回流20～60min，加盐酸1～3ml继续回流30min，放冷，再进行萃取与测定。
蒽醌类与碱液显色后，过氧化氢不能使其褪色，而其他有色物质可被其氧化褪色，对含有干扰测定成分的碱萃取液，加1%过氧化氢溶液少量，在沸水浴中加热4min氧化，冷却，定容，比色测定。
(2)先提取后水解 取供试品适量，加甲醇（或乙醇、氯仿等），对含葸醌的浸膏制剂，超声处理30min，使溶解。对含蒽醌的原植物药粉末制剂，应置索氏提取器中回流提取，至提取液无色，将甲醇回收至干，残渣用酸液水解，乙醚（或氯仿）萃取，依法测定。
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