Taq SYBR® Green qPCR Premix (Universal)
品牌 |
Annoron-安诺伦 |
货号 |
AS050038 |
产品分类 |
PCR系列 |
研究领域 |
|
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|
Taq SYBR® Green qPCR Premix
(Universal)
REF: AS050038
储运条件
长期保存请于 -20℃避光保存，Mix 融解后可在 4℃避光条件下稳定存放 一个月，尽量避免反复冻融。
产品组成
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组分
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规格
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Taq SYBR® Green qPCR Premix (Universal)
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5× 1 ml
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产品简介
Taq SYBR® Green qPCR Premix 是 SYBR® Green I 嵌合染料法 专用 qPCR 试剂，为 2× 预混液，包含除引物和 DNA 样品以外的所 有 qPCR 组分，可减少操作步骤，缩短加样时间，降低污染几率。其 核心组分是经抗体修饰的热启动 Taq DNA 聚合酶，配合精心优化的 Buffer 体系以及 PCR 反应促进因子， 使产品具有特异性强、扩增效 率高等特点，有效抑制非特异性扩增，可对宽广浓度范围的模板进行 准确定量， 获得稳定可靠的 qPCR 结果。
预混液中含有独特校正染料，与一系列 qPCR 设备兼容，包括需要 ROX 校正的仪器，实验操作过程中不需要额外添加染料来校正仪器。
使用方法
1. 使用注意
① 因 Mix 中预混有染料， 其保存或反应体系配制过程应避免强光照射； ② 使用前上下颠倒轻轻混匀 Mix， 请勿涡旋振荡混匀， 避免产生过多 气泡 ;
③ Mix 中含有 Universal 校正染料， 适用于所有机型， 无需额外添加 染料。
2. 建议的 qPCR 反应体系
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试剂
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使用量
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终浓度
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Taq SYBR® Green qPCR Premix
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10 μl
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1×
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正向引物 (10 μM)a
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0.4 μl
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0.2 μM
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反向引物 (10 μM)a
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0.4 μl
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0.2 μM
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DNA 模板 b
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X μl
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10~200 ng/20 μl
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Nuclease-Free Water
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To 20 μl
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a. 通常推荐的引物终浓度为 0.2 μM，反应效果不佳时可在 0.1~1 μM 范围内进 行调整；
b. 推荐模板加样量为 1~2 μl，如模板类型为未稀释 cDNA 原液，模板添加量不 应超过总反应体系的 10%。不同种类 DNA 模板中含有的靶基因拷贝数目不同， 必要时可进行梯度稀释，以确定最佳的 DNA 模板添加量。
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3. qPCR 反应程序（可根据机型适当调整）
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两步法
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步骤
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温度
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时间
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预变性
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95℃
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30 sec
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变性
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95℃
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10 sec
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退火 & 延伸 a
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60℃
|
30 sec
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熔解曲线 b
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使用仪器默认采集程序
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三步法
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步骤
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温度
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时间
|
|
预变性
|
95
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