详细说明
CRM001大肠菌群显色培养基
(Chromogenic Coliform Agar)
用 途:
大肠菌群显色培养基用于大肠菌群的快速检测和计数。
原 理:
蛋白胨和酵母膏粉提供碳氮源和微量元素;氯化钠可维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂;十二烷基硫酸钠抑制革兰氏阳性菌;显色底物与大肠菌群β-半乳萄糖苷酶发生特异性反应,水解底物,释放出显色基团,在淡黄色平板上产生绿色的菌落。
配方(每升):
蛋白胨 | 10g |
酵母膏粉 | 3g |
氯化钠 | 5g |
十二烷基硫酸钠 | 0.1g |
琼脂 | 12g |
显色底物 | 2.7g |
最终pH 7.0±0.2 |
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大肠菌群显色培养基使用方法:
1、称取大肠菌群显色培养基32.8g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,无需高压灭菌。
2、以无菌手续取样品25g或25mL,加入含225mL无菌磷酸盐缓冲液(或生理盐水)的三角瓶内,充分振摇或用均质器均质1min成1:10稀释液,然后以1:10继续稀释,选择三个适宜的连续稀释度,每个稀释度接种两个平皿。
3、采用倾注法:将培养基水浴冷却至约50℃,准备直径90mm已灭菌平皿,每个培养皿接种1ml样品,然后倾注约15ml上述溶解的培养基,混匀使其凝固,倒置,37℃培养24小时。
4、 采用表面接种法:冷却至约50℃,摇匀将培养基倾注于已灭菌平皿中。在室温可保存一天或在冰箱里贮存数天(避光,4℃)。样品用划线接种法或滤膜法,37℃培养24小时。
5、观察结果。
质量控制:
本品倾注平皿后呈淡黄色,下列菌株接种后于36±1℃培养18~24h生长情况如下表。
菌 名 | 菌 号 | 生长状况 | 培养特征 |
大肠埃希氏菌 | ATCC25922 | 良好 | 菌落绿色 |
柠檬酸杆菌 | ATCC8090 | 良好 | 菌落绿色 |
鼠伤寒沙门氏菌 | CMCC50115 | 良好 | 菌落无色 |
粪肠球菌 | ATCC29212 | 受抑制 | - |
贮 存:贮存于10-30℃,避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期二年。
规 格:可配置1L的培养基干粉。