详细说明
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概述
所有 GLuc 载体和质粒包含一个人源化的 Gaussia 荧光素酶编码序列,可以在哺乳动物细胞中进行最佳表达。
克隆载体
pGLuc-Basic 2 载体不含启动子;pGLuc Mini-TK 2 载体含有一小段启动子片段,来源于单纯疱疹病毒(HSV)胸苷激酶,位于 Gaussia 荧光素酶编码序列上游。将启动子或增强子克隆进入两种载体的多克隆位点(MCS),便可进行启动子和增强子的活性测试。
pTK-GLuc 载体含有单纯疱疹病毒(HSV)胸苷激酶启动子,用于组成型表达 GLuc。在该载体的 GLuc 终止密码子和多聚腺苷酸信号之间包含一段 MCS。被克隆进入 3´ UTR 的序列将成为 GLuc mRNA 的一部分。RNAi 或 miRNA 靶位点等序列可插入 GLuc 的 3´ 非翻译区,以评价 RNAi 或 miRNA的靶序列。
另外,所有的载体(pSV40-GLuc 对照质粒除外)均携带有一个新霉素(Neomycin)抗性标记,用以产生稳定的转染细胞系。
对照质粒
pCMV-GLuc 2 对照质粒携带有一个组成型的巨细胞病毒(CMV)启动子,可在许多类型的细胞中启动高水平的表达。pCMV-GLuc 2 可以在单独转染实验或与其它报告载体联合使用中作为阳性对照。
pSV40-GLuc 对照质粒在猿猴病毒 40(SV40)启动子控制下组成型表达 GLuc。可以作为转染实验中的阳性对照。该质粒不携带选择标记。
来源
GLuc 载体和对照质粒经过标准质粒纯化程序,分离自 E. coli 菌株 ER2272。
浓度
500 μg/ml。
参考文献
关于该类产品性质和应用的文献,请登陆 www.neb-china.com,www.neb.com。
限制性酶切图谱
pGLuc-Basic 2 载体的详细描述和限制性酶切图谱请见 350 页。查看荧光素酶载体和对照质粒的序列文件,请登陆 www.neb-china.com,www. neb.com。








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