质量水平

500

无菌性

sterile; sterile-filtered

形式

liquid

组分

phenol red: 10.62 mg/L
NaHCO₃: 350 mg/L

运输

dry ice

储存温度

−20°C

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相关类别

Classical Media & Buffers

应用

该产品的典型用途是使黏附细胞从培养表面脱落。

生化/生理作用

胰蛋白酶可切割赖氨酸和精氨酸残基的C端肽。  如果酸性残基位于切割位点的两侧，则该反应的水解速度减慢，而如果脯氨酸残基位于切割位点的羧基侧，则不水解。  胰蛋白酶活性的最佳pH为7-9。  胰蛋白酶还可以切割氨基酸合成衍生物的酯键和酰胺键。  将EDTA作为螯合剂添加到胰蛋白酶溶液中，可中和掩盖胰蛋白酶作用肽键的钙镁离子。  去除这些离子可增加酶活性。  

DFP、TLCK、APMSF、AEBSEF和抑肽酶等丝氨酸蛋白酶抑制剂可抑制胰蛋白酶。  

组分

胰蛋白酶由由 223 个氨基酸残基组成的单链多肽组成，通过去除胰蛋白酶原的 N-末端六肽而产生，其在 Lys-lle 肽键处裂解。氨基酸序列由 6 个二硫键交联。这是胰蛋白酶的天然形式，即 β-胰蛋白酶。β-胰蛋白酶可被自溶，在赖氨酸残基处裂解，生成 α-胰蛋白酶。胰蛋白酶是丝氨酸蛋白酶家族的一员。  

注意

本品冷冻保存于-10～-40°C，应避免反复冻融循环。

制备说明

该产品中含有酚红。由于该产品通过干冰进行运输，所以包装会有明显的二氧化碳累积。这些CO₂可能会进入溶液并略微降低pH，从而呈橙色而非淡粉色。这种橙色的溶液依然适合使用，或者也可使用氢氧化钠对pH进行调整。用浓度过高的胰蛋白酶长时间孵育细胞会破坏细胞膜并杀死细胞。溶解胰蛋白酶或由浓溶液稀释应使用不含Ca²⁺ 或Mg²⁺的缓冲盐溶液。使细胞从附着面脱落所需的胰蛋白酶浓度主要取决于细胞类型和培养阶段。