质量水平

400

描述

for research or for further manufacturing use

无菌性

sterile-filtered

形式

liquid

组分

NaHCO₃: 350.000 mg/L
phenol red: 10.620 mg/L

运输

dry ice

储存温度

−20°C

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相关类别

Classical Media & Buffers

一般描述

胰蛋白酶是由含223个氨基酸残基的单链多肽组成的，它通过切割胰蛋白酶原的Lys-1le肽键以去除N-末端六肽而获得。氨基酸序列通过六个二硫键交联。这是天然形式的胰蛋白酶——β-胰蛋白酶。β-胰蛋白酶可以自溶，在Lys-Ser残基处断裂，产生α-胰蛋白酶。胰蛋白酶是丝氨酸蛋白酶家族的成员。  

应用

本品的典型用途是使贴壁细胞从培养表面脱落。使细胞解离所需的胰蛋白酶浓度主要取决于细胞类型和培养物代数。  
胰蛋白酶-EDTA溶液1X已用于细胞的解离/胰蛋白酶消化。

生化/生理作用

胰蛋白酶可切割赖氨酸和精氨酸残基的C末端肽段。如果酸性残基位于切割位点的任意一侧，则该反应的水解速度减慢，并且如果脯氨酸残基位于切割位点的羧基侧，则水解停止。胰蛋白酶活性的最佳pH条件为7-9。胰蛋白酶还可以切割氨基酸合成衍生物的酯和酰胺键。将EDTA（乙二胺四乙酸）添加到胰蛋白酶溶液中作为螯合剂，用于中和钙离子和镁离子以防止其抑制胰蛋白酶活性。去除这些离子会增加酶活性。

丝氨酸蛋白酶抑制剂，包括DFP（二异丙基氟磷酸盐）、TLCK（Na-p-甲苯磺酰基-L-赖氨酸氯甲基酮）、APMSF（4-脒基苯基甲磺酰氟）、AEBSEF（4-（2-氨基甲基）苯磺酰氟）和抑肽酶等，会抑制胰蛋白酶。

注意

本品应置于-10至-40°C环境冷冻储存。避免反复冻融。

制备说明

本产品含有酚红。  由于在干冰上运输，包装中可能累积大量二氧化碳。  这些CO₂ 可能会进入溶液并略微降低pH值，使溶液呈橙色而不是粉红色。  橙色溶液仍然可以使用，或者可以用氢氧化钠调节pH。  使用高浓度胰蛋白酶长时间孵育细胞，会破坏细胞膜并杀死细胞。  溶解胰蛋白酶或稀释浓缩胰蛋白酶溶液时，应使用不含Ca²⁺ 或Mg²⁺的缓冲盐溶液。