弧菌显色培养基使用说明书

　　(Chromogenic Vibrio Agar)

　　【包装规格】

　　环凯货号 CRM008(干粉);CP0570(即用型平板)

　　包装形式 71.3g/瓶;20套(φ9cm) /盒

　　【产品用途】

　　弧菌显色培养基用于水产品及食物中毒样品中弧菌特别是副溶血性弧菌的分离和鉴定。

　　【检验原理】

　　蛋白胨和酵母膏粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源;蔗糖为可发酵的糖类;抑菌剂抑制大部分非弧菌细菌，氯化钠可维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂;混合色素与副溶血性弧菌、霍乱弧菌和创伤弧菌所对应的酶发生特异性反应，水解底物，释放出显色基团，在淡黄色平板上产生品红色菌落(副溶血性弧菌)和绿-蓝绿色的菌落(霍乱弧菌和创伤弧菌)。

　　【配方成分】

　　弧菌显色培养基配方(每升) 含量：

　　蛋白胨 18.8g

　　酵母膏粉 5.0g

　　氯化钠 10.0g

　　蔗糖 20.0g

　　抑菌剂 1.5g

　　琼脂 13.0g

　　混合色素 3.0g

　　最终pH 9.0±0.2

　　【使用方法】

　　1、取瓶内弧菌显色培养基干粉71.3克，用1000ml蒸馏水或纯水溶解，可按比例扩增或缩小。搅拌加热煮沸至完全溶解，不需高压灭菌，冷至约50℃，倾注灭菌平皿。

　　2、以无菌操作取检样25 g(mL)，加入3%氯化钠碱性蛋白胨水225 mL，用旋转刀片式均质器以8 000 r/min均质1 min，或拍击式均质器拍击2 min，或用Pulsifier脉冲式样品处理器均质30秒，制备成1:10的均匀稀释液。如无均质器，则将样品放入无菌乳钵中磨碎，然后放在500 mL的灭菌容器内，加225 mL3%氯化钠碱性蛋白胨水，并充分振荡。

　　3、增菌：将上述1:10稀释液于36 ±1 ℃培养8～18h。

　　4、分离：在增菌液中用接种环取一环，于弧菌显色平板上划线分离，于36 ±1 ℃培养18～24 h。

　　5、通过验证试验进一步确认假定性副溶血性弧菌和其他弧菌，如氧化酶、革兰氏染色、生化鉴定等。进一步的试验。

　　注：如产品类型为干粉，按上述1-5进行操作;若为即用型平板，按2-5进行操作即可。

　　【质量控制】

　　【储存条件及保质期】

　　即用型平板： 2~8℃，避光保存，贮存期三个月。

　　脱水干粉培养基：旋紧瓶盖，2~8℃密封干燥保存，贮存期二年。

　　【注意事项】

　　1. 称量时注意粉尘，佩戴口罩操作以避免引起呼吸道系统不适。

　　2. 干粉培养基使用后立即旋紧瓶盖，避免吸潮结块。

　　3. 自制平板时需注意培养基的厚度，厚度过薄容易造成琼脂水分保持性下降，开裂;因此，一般需要15-20mL(Φ90mm)体积培养基，平板培养基厚度至少为2mm。

　　4. 即用型成品平板应该尽量保持在2-8℃下保存且与存放容器冷凝管保持一定距离以避免冻损坏。产品多次在低温与常温之间变更会引起琼脂的泌水，属于正常现象。使用前应平衡至室温且尽量在无菌干燥箱中预干燥。

　　5. 质检报告可以登录环凯网站http://www.huankai.com， 打开“客服中心”页面，输入产品批号下载。

　　【废物处理】

　　检测之后带菌平板置于121℃下高压灭菌30分钟后处理。

　　【执行标准】

　　Q/HKSJ 03-2011 广东环凯微生物科技有限公司企业标准 普通微生物培养基

　　【说明版本】

　　2013年1月14日

　　【参考文献】

　　1.GB/T4789.7-2008 中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物学检验 副溶血性弧菌检验

　　2.SN0173-2010 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 出口食品中副溶血性弧菌检验

　　3.SN1022-2010中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 出口食品中霍乱弧菌检验