详细说明
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- Target species: mouse
- Plasmid는 C15orf52-특정 20 nt guide RNA sequences으로 구성되였으며 이는 GeCKO (v2) library에서 유래 되였습니다.
- gRNA sequences는 Cas9프로틴을 인도하여 게놈DNA 특정위치에 double strand break (DSB)를 형성합니다.
- All products are provided as transfection-ready, purified plasmid DNA, except the Lentiviral Activation Particles which have been prepackaged as Lentiviral Particles for use with hard-to-transfect cells
Description
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HDR Plasmid- 20 µg of transfection-ready, purified plasmid DNA; Suitable for up to 20 transfections
- C15orf52 CRISPR/Cas9 Knockout (KO) Plasmid (m) 는 3개의 plasmids를 포함하며 매개의 plasmid는 Cas9 nuclease 와 하나의 C15orf52-특정된 20 nt guide RNA (gRNA) 를 인코딩하며 gRNA는 knockout 효율을 최대한 낮추도록 디자인 되였습니다.
- gRNA sequences는 GeCKO (v2) library에서 찾을수 있으며 직접 Cas9 프로틴을 유도하여 유전자 DNA의(%link_11%) 특정된 위치에서 double strand break (DSB)를 완성할수있습니다.
- Cas9로 인한 DSB를 포함한 세포를 선발하려면C15orf52 HDR Plasmid (m) (sc-431922-HDR) 와의 co-transfection를 권장합니다
- contact Technical Service for availability of control antibody
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Description
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Double Nickase Plasmids- 20 µg of transfection-ready, purified plasmid DNA; Suitable for up to 20 transfections
- C15orf52 HDR Plasmid (m) 는 C15orf52 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m)와의 co-transfection을 권장합니다.
- C15orf52 HDR Plasmid (m) 는 2-3 plasmids를 포함하며, 매개의 plasmid는 homology-directed DNA repair (HDR) template 는 C15orf52 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m)로 인한 cut site와 대응됩니다.
- 매 HDR template은 두개의 800 bp homology arms이 디자인되여있어 Cas9-induced double strand DNA break site주변의 genomic DNA 와 결합합니다
- 매 HDR Plasmid 에는 puromycin resistance gene이 있어 stable knockout (KO) cells을 얻을수있으며 RFP (Red Fluorescent Protein) gene이 있어 형질주입효율을 관찰할수있습니다.
- Puromycin resistance와 RFP genes는 두개의 LoxP sites 사이에 위치하여 Cre Vector sc-418923로 추가가공이 가능합니다.
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Description
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CRISPR Activation Plasmids- 20 µg of transfection-ready, purified plasmid DNA; Suitable for up to 20 transfections
- C15orf52 Double Nickase Plasmid (m) 는 한쌍의D10A mutated Cas9 nuclease 와 타깃특정 20 nt guide RNA (gRNA)를 인코딩하는 plasmid를 포함하고있으며 gRNA는 대응 CRISPR/Cas9 KO보다 높은 특이성을 띤 knockout gene을 발현하도록 디자인되였습니다.
- 한쌍의 gRNA는 약 20bp가량 떨어져 있으며 이는 게놈DNA의 Cas9-mediated double nicking을 발생하여 DSB를 모방합니다.
- 한쌍의 plasmid 중 하나는 selection에 필요한 puromycin-resistance gene을, 다른하나는 형질주입효율을 확인하는 GFP marker를 보유하고있습니다.
- C15orf52 Double Nickase Plasmid (m2)가 인코딩한 한쌍의 gRNAs는 C15orf52 Double Nickase Plasmid (m)가 인코딩한것과 다릅니다.
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Description
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Lentiviral Activation Particles- 20 µg of transfection-ready, purified plasmid DNA; Suitable for up to 20 transfections
- C15orf52 CRISPR Activation Plasmid (m) 는 synergistic activation mediator (SAM) transcription activation system으로 특정유전자 발현을 upregulate하도록 디자인되였습니다.
- C15orf52 CRISPR Activation Plasmid (m) 는 세개의 plasmid가 1:1:1 의 비례로 포함되여있으며 각각 transactivation domain인 VP64에 융합시킨 deactivated Cas9 (dCas9) 뉴클리아제 (D10A and N863A) 와 blasticidin resistance gene을 인코딩; MS2-p65-HSF1융합프로틴과 hygromycin resistance gene을 인코딩; 타깃특정 20 nt guide RNA와 puromycin resistance gene을 인코딩합니다.
- The resulting SAM complex binds to a site-specific region approximately 200-250 nt upstream of the transcriptional start site and provides robust recruitment of transcription factors for highly efficient gene activation
- C15orf52 CRISPR Activation Plasmid (m2) 의 The sgRNA (MS2) plasmid 가 인코딩한 타깃특정 20 nt guide RNA는C15orf52 CRISPR Activation Plasmid (m)의 The sgRNA (MS2) plasmid 가 인코딩한것과 다릅니다.
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Description
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- 200 µl of transduction-ready, high-titer CRISPR/dCas9 Lentiviral Activation Particles
- C15orf52 Lentiviral Activation Particles (m) 는 synergistic activation mediator (SAM) transcription activation system으로 세포에 대한lentiviral transduction을 통해 특정유전자 발현을 upregulate하도록 디자인되였습니다.
- C15orf52 Lentiviral Activation Particles (m) 은 아래의 SAM Activation elements를 포함하고 있습니다: transactivation domain VP64과 융합된 deactivated Cas9 (dCas9) 뉴클리아제 (D10A and N863A),MS2-p65-HSF1융합 프로틴과 타깃특정 20 nt. guide RNA. 또한 각각 blasticidin, hygromycin 과 puromycin resistance genes를 포함하고있습니다.
- SAM complex는 transduction후 transcriptional start site상류의 약 200-250 nt의 특정위치에 바인딩하여 고효율gene activation에 필요한 transcription factor을 증가시킵니다.
- C15orf52 Lentiviral Activation Particles (m2) 이 인코딩한 타깃 특정 20 nt guide RNA는 C15orf52 Lentiviral Activation Particles (m)이 인코딩한것과 다릅니다.
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400-6226-992