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碧云天生产的JM110甘油菌，是收集生长在对数期的JM110菌，加入含有甘油的细菌冻存液制备而成。可以直接划平板或小量、大量培养。本菌株存在Dam和Dcm甲基化缺陷，用本菌株扩增的质粒可以用于对相应甲基化敏感的内切酶的酶切。

JM110菌株由于甲基化酶基因Dam和Dcm的缺失，使得在该宿主菌中扩增的质粒DNA或噬菌体DNA(phagemid DNA)没有发生相应的甲基化修饰，因而能被某些对相应甲基化修饰敏感的限制性内切酶酶切。Dam甲基化酶识别DNA序列GATC上的腺嘌呤残基并使其N-6位点上发生甲基化，而Dcm甲基化酶识别DNA序列CCAGG和CCTGG上的胞嘧啶残基并使其C-5位点上发生甲基化。

JM110菌株的基因型为：rpsL (Str^r) thr leu thi-1 lacY galK galT ara tonA tsx dam dcm supE44 ∆(lac-proAB) [F´ traD36 proAB lacI^q Z∆M15]。

JM110菌株具有链霉素抗性(Str^r)，并且在F´ episome上含有lacI^q Z∆M15基因，可用于蓝白斑筛选。

JM110菌株核酸酶表达水平较高，在利用其进行质粒扩增时，可使用碧云天生产的质粒小量抽提试剂盒(通用型) (D0007S或D0007M)、质粒中量抽提试剂盒(通用型) (D0020)或质粒大量抽提试剂盒(通用型) (D0028)进行质粒抽提。

本菌株可以使用常规的LB培养基或SOC培养基进行培养。

关于碧云天不同甘油菌菌种的比较和选择，可参考我们的相关网页：http://www.beyotime.com/support/strain.htm

包装清单：    

保存条件：  
   

-20℃保存，一年有效。-80℃可以长期保存。

注意事项：  
   

使用本甘油菌时可以不必完全融解，在甘油菌表面蘸取少量涂板或进行液体培养即可。也可以完全融解后使用，但随着冻融次数的增加细菌的活力会逐渐下降。在没有结冻的情况下，菌体会逐渐沉淀至管底，请务必注意适当混匀后使用。

为保证菌种纯正，避免其它细菌污染，尽量先划平板然后再挑单克隆菌落进行后续操作。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

1. 划平板接种：    
取出JM110甘油菌置于冰上，并置于超净台内，后续操作都在超净台内操作。    
a.    用镊子和塑料枪头操作：镊子的顶端在70%酒精中蘸一下，并且在酒精灯上略略烧一下，使镊子的顶端处于无菌状态。用镊子夹取一个无菌的200µl塑料枪头，蘸取少量JM110甘油菌，然后把蘸有菌液的塑料枪头，以尽量和LB平板(含有50µg/ml链霉素)接近平行的角度，在LB平板上连续作S形或Z形划动，再用一无菌的200µl塑料枪头，在原先的划线上以90°或120°角，再在LB平板上连续作S形或Z形划动。通常换枪头重复操作2-3次即可。37℃倒置培养过夜。    
b.    用接种环操作：将接种环在酒精灯上略略烧一下，使接种环处于无菌状态。微冷后，蘸取少量JM110甘油菌，在LB平板(含有50µg/ml链霉素)上连续作S形或Z形划动。把接种环再烧一下，微冷后，在原先的划线上以90°或120°角，再在LB平板上连续作S形或Z形划动。通常用接种环重复操作2-3次即可。37℃倒置培养过夜。    
    2.直接培养：    
取出JM110甘油菌置于冰上，并置于超净台内，后续操作都在超净台内操作。把镊子的顶端在70%酒精中蘸一下，并且在酒精灯上略略烧一下，使镊子的顶端处于无菌状态。用镊子夹取一个无菌的塑料枪头或牙签，蘸取少量JM110甘油菌，然后把蘸有菌液的塑料枪头或牙签放到装有3ml LB(含有50µg/ml链霉素)的细菌培养试管内或装有100ml或更大体积LB(含有50µg/ml链霉素)的细菌培养瓶内。37℃，约200rpm培养过夜。    
    3.感受态细菌的制备    
可以使用碧云天的    一步法感受态细菌制备试剂盒(D0301)、    超级感受态细菌制备试剂盒(D0302)或其它方法进行感受态细菌的制备。    
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