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BL21(DE3)chemically Competent Cell大肠杆菌感受态BL21(DE3)
仪器描述


                       产品说明:大肠杆菌感受态BL21使用特殊工艺制作,可用于质粒DNA化学转化,转化效率较高
产品特点: BL21菌株用于以T7 RNA聚合酶为表达系统的高效外源基因的蛋白表达宿主。T7噬菌体RNA聚合酶基因的表达受控于λ噬菌体DE3区的lacUV5启动子,该区整合于BL21的染色体上。该菌适合于非毒性蛋白的表达
使用方法:

从-70℃ 超低温冰箱中取出一管感受态菌,冰浴10 min使其解冻;

加入适量目的质粒DNA,冰浴30 min;

插入42℃水浴中90S进行热休克,然后冰浴5 min;

加入0.7ml无抗LB培养基(培养基预热至37℃),然后37℃ 160-180rpm/min震荡培养45-60min;

取上述转化混合液100-300μl,在含合适抗菌素的固体LB平板培养皿上用玻璃涂布棒涂布均匀;

*如果载体和宿主菌适合蓝白斑筛选的话,滴完菌液后再在平板上滴加40μl 2% X-gal,8μl 20% IPTG,涂布均匀;

放入37℃恒温培养箱倒置培养过夜;

观察平板上长出的菌落克隆

储存条件:-70℃保存6个月,不适宜液氮保存
规格:100ul/只
注意事项:

刚化冻的感受态细胞转化效率最高;

避免反复冻融;

避免移液枪反复吹打;

震荡培养转速不宜过高,时间不能超过60min;

转化操作需要轻柔;

加培养基、涂板等操作需要在超净工作台中进行;玻璃涂布棒需要用酒精灯烧过



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注:该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案,不可用于临床诊断或治疗等相关用途

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