背景: 单细胞凝胶电泳技术(SCGE)又称彗星试验(comet assay)
其原理是:当各种内外源DNA损伤因子诱发细胞DNA链断裂时,DNA的超螺旋结构受到破坏,在细胞裂解液作用下,细胞膜、核膜等膜结构受到破坏,细胞内的蛋白质、RNA以及其它成分均扩散到细胞裂解液中,而核DNA由于分子量太大只能留在原位。在中性条件时,DNA片段可进入凝胶发生迁移,而在碱处理和碱性电解质的作用下,DNA发生解螺旋,损伤的DNA断链及片段被释放出来,由于这些DNA的分子量很小,所以在电泳过程中会离开核DNA向阳极移动,形成彗星状的图像,而未损伤的DNA部分保持球形。DNA受损越严重,产生的断片越多并且片段越小,电泳时迁移的DNA量也就越大,迁移距离越长,荧光显微镜下可观察到尾长增加、尾部荧光强度增强。在一定条件下,DNA迁移距离(彗星尾长)和DNA含量(荧光强度)分布与DNA损伤程度呈线性相关,因此,尾矩(尾部DNA的含量与尾长的乘积)成为定量测定单个细胞DNA损伤程度的主要依据。
技术参数:
系统尺寸 (W x L x H) 31 x 47.5 x 6.5cm
有效槽面积 (W x L x H) 27.5 x 37 x 3.5cm
建议缓冲液容量ml 800
载玻片容量 (25 x 75mm; W x L) 40
建议使用环境 5V/cm (300mA) 5V/cm (300mA)
输出电源连接口径mm 4
建议电源 EV261 600 Volts, 1000 mAmps, 300 Watts
彗星实验凝胶电泳,comet-40
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