稳定细胞株构建

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      1.原理：

       将外源DNA克隆到具有某种抗性的载体上，载体通过慢病毒包装被感染到宿主细胞并整合到宿主染色体中，用载体中所含抗性基因进行筛选。得到可稳定表达目的蛋白，或者稳定表达沉默特定基因的细胞株。

       shRNA细胞株构建原理：短发卡RNA（shRNA）是可以克隆到表达载体并表达短的干扰RNA（sIrna,19-21个核苷酸的RNA双链）的DNA分子。我们可根据靶标设计短发卡RNA（shRNA）序列并将其克隆岛特定载体上。短发夹RNA是设计为能够形成发夹结构的非编码小RNA分子，可通过RNA干扰来抑制基因的表达。

过表达细胞株构建原理：通过人工构建的方式在目的基因上游加入调控元件，使基因可以在人为控制的条件下实现大量转录和翻译，从而实现基因产物的过表达。

       KO细胞株构建原理：基因敲除是自80年代末以来发展起来的一种新型分子生物学技术，是通过一定的途径使机体特定的基因失活或缺失的技术。通常意义上的基因敲除主要是应用DNA同源重组原理，用设计的同源片段替代靶基因片段，从而达到基因敲除的目的。随着基因敲除技术的发展，除了同源重组外，新的原理和技术也逐渐被应用，比较成功的有基因的插入突变和iRNA，它们同样可以达到基因敲除的目的。

       2.技术应用

        需要长期观察外源基因表达的作用，进行长期药理学研究、基因治疗研究、遗传调控机制研究或需要进行大规模蛋白合成则需要构建稳转株。

       3.实验流程：

     4.结果展示：

                                                                                              DU145细胞荧光图                              SW480细胞荧光图

       客户提供：细胞株（冻存管/培养细胞），目的基因的质粒/菌株，目的蛋白抗体，目的基因的载体信息、细胞培养信息

       HYY提供：细胞株两管冻存管或一瓶复苏细胞，细胞株构建报告，QPCR鉴定报告，WB鉴定报告 
 

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稳定细胞株构建信息由广州辉园苑医药科技有限公司为您提供，如您想了解更多关于稳定细胞株构建报价、型号、参数等信息，欢迎来电或留言咨询。

注：该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案，不可用于临床诊断或治疗等相关用途