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Elisa代测

2024-11-0400

♦ 服务介绍


       酶联免疫(ELISA),利用抗原与抗体的特异性反应将待测物与酶连接,然后TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。根据颜色反应定量目标抗原或抗体含量。该技术可用于检测大分子抗原和特异性抗体等,具有快速、灵敏、简便、载体易于标准化等优点。


♦ 实验流程


       试剂盒:以实际试剂盒品牌为准

  实验流程(具体步骤以说明书为准):

  1.样本准备:血清、血浆、组织匀浆、细胞上清;

  2.操作步骤:处理样本配制标准品—加样(标准品及样本)—洗板,加检测抗体溶液,孵育—洗板,加酶溶液,孵育— 洗板,加TMB底物— 加终止液50ul,立即450nm读数(双抗夹心法)

  处理样本配制标准品—加样(标准品及样本)—加酶溶液—加检测抗体— 混匀孵育— 洗板,加TMB显色— 加终止液50ul,立即450nm读数(竞争法)

  3.实验结果:有样本OD值代入标曲中计算出浓度,结果以EXCEL形式发出。


♦ 送样运输要求


      1、动植物组织样本(干冰运输)

  准确称取动物组织重量按重量(mg):体积(ul)=1:9的比例加入9倍体积的匀浆介质(推荐0.86%或0.9%的生理盐水),冰水浴条件下,机械匀浆,制备成10%的匀浆液,2500~3000转/分钟,离心10分钟,取上清液进行测定。

  2、血清样本(干冰运输)

  全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于2-8℃ 3000转/分离心15min,取上清即可立即检测;或进行分装,并将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。解冻后的样本应再次离心,然后检测。

  3、血浆样本(干冰运输)

  可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2-8℃3000转/分离心15min,取上清即可立即检测;或进行分装,并将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。解冻后的样本应再次离心,然后检测。

  4、细胞样本

  贴壁细胞:将细胞用PBS冲洗2次后,用细胞刮将细胞小心刮下来,将培养液3000转/分,离心10min。弃上清留细胞沉淀,干冰运输。

  悬浮细胞:将培养液3000转/分,离心10min。弃上清留细胞沉淀,干冰运输。

  细胞上清:标本于2-8℃,3000转/分离心15min取上清,上清立即用于实验,或分装后于-20℃或-80℃保存。避免反复冻融。


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